Implication of the fecal egg count reduction test (FECRT) in sheep for better use of available drugs / Implicação do teste de redução da contagem de ovos nas fezes (TRCOF) em ovinos para melhor uso dos anti-helmínticos disponíveis

Abstract The aim here is to present data on the efficacy of anthelmintics in sheep flocks in Rio de Janeiro, Brazil, and to discuss the interpretation of the fecal egg count reduction test (FECRT) for each nematode genus. Fecal eggs counts and pre- and post-treatment coprocultures were performed, the former to evaluate the efficacy of and the latter to determine the overall parasite prevalence. An additional efficacy test was performed at Farm # 1 a year after the initial test. Severe anthelmintic resistance was found for the flocks, with no FECRT sensitivity at any of the 22 farms evaluated. However, an analysis of the infective larvae showed that some drugs were effective against certain parasitic genera; i.e., levamisole was more effective against Haemonchus spp. and moxidectin against Trichostrongylus spp. In the additional FECRT performed at Farm # 1, moxidectin and nitroxynil were ineffective separately, but when applied in combination they were highly effective due to their efficacy against Haemonchus (nitroxynil) and Trichostrongylus (moxidectin), respectively. The use of the FECRT targeting the parasitic nematode species prevalent on farms may make it possible to choose more effective anthelmintics.

Resumo O objetivo deste trabalho foi apresentar dados sobre a eficácia de anti-helmínticos em rebanhos ovinos no Rio de Janeiro, Brasil, e discutir a interpretação do teste de redução da contagem de ovos nas fezes (TRCOF) para cada gênero de nematoide. A contagem de ovos fecais (OPG) e coprocultura pré e pós-tratamento foram realizadas para avaliar a eficácia e a prevalência geral do parasito, respectivamente. Um teste de eficácia adicional foi realizado na Fazenda # 1 após um ano do teste inicial. Resistência anti-helmíntica grave foi encontrada, não havendo sensibilidade no TRCOF em nenhuma das 22 fazendas avaliadas. No entanto, na análise das larvas infectantes observou-se que algumas drogas foram eficazes contra certos gêneros parasitários; por exemplo, o levamisol foi mais eficaz contra Haemonchus spp. e a moxidectina contra Trichostrongylus spp. No TRCOF adicional realizado na Fazenda 1, a moxidectina e o nitroxinil foram ineficazes separadamente, mas quando aplicados em combinação, foram altamente eficazes devido à sua eficácia contra Haemonchus spp. (nitroxinil) e Trichostrongylus spp. (moxidectina), respectivamente. O TRCOF visando às espécies de nematoides parasitas prevalentes nas fazendas pode possibilitar a escolha de anti-helmínticos mais eficazes.

Características ultrassonográficas de fígado, vesícula biliar, rins, vesícula urinária e jejuno em coelhos jovens e adultos / Ultrasound features of liver, gallbladder kidneys, urinary bladder and jejunum in young and adult rabbits

O presente trabalho descreveu características e comparou mensurações do fígado, vesícula biliar, rins, vesícula urinária e jejuno de coelhos da raça Nova Zelândia Branco (NZB) jovens e adultos. O grupo dos jovens foi composto por 39 coelhos de ambos os sexos (20 machos e 19 fêmeas), desmamados aos 30-31 dias de idade, sendo as avaliações realizadas aos 35, 56 e 77 dias de idade. O grupo dos adultos foi composto por 23 fêmeas e 15 machos, com idade superior a 6 meses, sendo realizada uma avaliação ultrassonográfica por animal. O exame consistiu na avaliação do fígado, vesícula biliar, rins direito e esquerdo, jejuno e vesícula urinária. Todos os animais foram pesados antes dos exames. O peso médio dos animais aumentou (p<0,05) dos 35 dias até a idade adulta. Tanto nos adultos quanto nos jovens, o fígado apresentou-se predominantemente isoecogênico ao rim direito e com textura homogênea. A vesícula biliar apresentou-se em formato ovoide alongado, variando de piriforme à amendoado, com conteúdo anecogênico, não sendo visível em 2,6% dos coelhos jovens e em 26,3% dos adultos. O comprimento e a largura da vesícula biliar nas idades de 35, 56, 77 dias e adultos foram: 1,06 e 0,39; 1,44 e 0,53; 1,41 e 0,58; 1,57 e 0,67cm, respectivamente. Considerando jovens e adultos, as mensurações da vesícula biliar e dos rins esquerdo e direito apresentaram correlação positiva (p<0,05) com o peso. Os rins apresentaram-se no formato de elipse e com superfície regular, com aumento (p<0,05) dos 35 dias à idade adulta. Houve correlação positiva (p<0,05) entre os volumes renais direito e esquerdo. A descrição da vesícula urinária mais encontrada (86%) foi a com conteúdo anecogênico, com pequenas estruturas ecogênicas livres no lúmen, tanto em jovens quanto em adultos. Não houve diferença (p>0,05) da espessura das camadas do jejuno entre as idades, apresentando média de 0,23 cm para todos os animais. Estes são os primeiros dados brasileiros de características ultrassonográficas de fígado, vesícula biliar, rins, jejuno e vesícula urinária para coelhos NZB de 35, 56 e 77 dias de vida e adultos.(AU)

This study described characteristics and measurements of the liver, gallbladder, kidney, urinary bladder and jejunum of young and adults New Zealand White (NZW) rabbits. The young rabbits's group was composed of 39 rabbits of both sexes (20 males and 19 females), weaned at 30-31 days of age, and the evaluations carried out at 35, 56 and 77 days of age. The adults group was composed of 23 females and 15 males, with more than 6 months of age, and one ultrasonographic evaluation per animal. The exam consisted in the evaluation of liver, gallbladder, right and left kidneys, jejunum and urinary bladder. All the animals were weighed before the evaluations. The average weight increased (p<0.05) from 35 days to adults. Both in adult and in young rabbits, the liver presented predominantly isoechogenic in relation of right kidney and with homogeneous texture. The gallbladder had an elongated ovoid shape, ranging for pear-shaped to almond, with anechogenic content, not being visible in 2.6% of young rabbits and 26.3% of adults. The length and width were 1.06 and 0.39; 1.44 and 0.53; 1.41 and 0.58; 1.57 and 0.67cm, respectively at 35, 56, 77 days and adults. For young and adults rabbits, the gallbladder and the left and right kidneys were positively correlated (p<0.05) with weight. The kidneys had an ellipse shape with smooth surface, increasing (p>0.05) from 35 days to adulthood. There was a positive correlation (p<0.05) between the right and left kidney volumes. The description of urinary bladder more frequently (86%) observed was anechogenic content, with small free echogenic structure within the lumen, both in young and in adult rabbits. There was no difference (p>0.05) in the thickness of the layers of the jejunum among ages, with the mean of 0.23cm for all animals. With the results, the first Brazilian ultrasonographic data for liver, gallbladder, kidney, jejunum and urinary bladder were defined to NZW rabbits in 35, 56 and 77days of life, as well as adults.(AU)

Prion protein gene polymorphisms and accumulation of pathogenic prion protein (PrPSc) in a herd with previously confirmed scrapie cases / Polimorfismos do gene da proteína priônica celular (PRNP) e distribuição da proteína priônica alterada (PrPSc) em rebanho com surto anterior de scrapie

Scrapie in sheep is associated with at least three polymorphisms in the prion protein gene (PRNP) on codons 136, 154, and 171. Countries where scrapie is endemic have been using breeding programs based on selection for the most resistant alleles. There are some PRNP genotyping data on sheep in Brazil, and scrapie has sporadically been observed since 1978. Paraná is the Brazilian state where most of the cases of scrapie have been diagnosed. A flock that had three clinical scrapie cases in 2003 and 2004 was genotyped (128 sheep: 53 pure Hampshire Down and 75 crossbred) and slaughtered (111 sheep: 47 pure Hampshire Down and 64 crossbred) in 2006. Samples of lymphoid and central nervous tissues were examined by immunohistochemistry (IHC) for altered prion protein (PrPSc). Six genotypes were detected in the 128 genotyped animals: ARR/ARQ was the most frequent (45.3%), followed by ARQ/ARQ (28.1%), ARR/ARR (14.1%), and ARQ/VRQ (8.6%). ARR/VRQ and ARQ/AHQ showed less than 2.5% genotype frequency. IHC identified 16 positive sheep. Palatine tonsil tissue had the highest percentage of reactive samples: 81.25% of the total positive samples. Of these 16 positive animals, nine (56.25%) had genotype ARR/ARQ, five (31.25%) had genotype ARQ/ARQ, and the remaining two (12.5%) had genotype ARQ/VRQ. All the positive animals were clinically healthy, and therefore represented 14.14% of pre-clinical cases of scrapie in this flock.

Scrapie nos ovinos está associada a pelo menos três polimorfismos do gene da proteína priônica celular (PRNP) nos códons 136, 154 e 171. Países onde o scrapie é endêmico têm utilizado programas de melhoramento, com a seleção para os alelos mais resistentes. Há alguns dados disponíveis de genotipagem do PRNP em ovinos no Brasil, e o scrapie tem sido observado esporadicamente desde 1978. O Paraná é o Estado brasileiro onde a maioria dos casos de scrapie foi diagnosticada. Um rebanho, que teve três casos clínicos de scrapie em 2003 e 2004, foi genotipado (128 ovinos - 53 Hampshire Down e 75 mestiços) e abatido (111 ovinos - 47 Hampshire Down e 64 mestiços) em 2006. Amostras de tecido linfóide e sistema nervoso central foram examinadas por imunohistoquímica (IHQ) para presença de proteína priônica alterada (PrPSc). Seis genótipos foram encontrados nos 128 animais genotipados: ARR/ARQ foi o mais frequente (45,3%), seguido por ARQ/ARQ (28,1%), ARR/ARR (14,1%) e ARQ/VRQ (8,6%). ARR/VRQ e ARQ/AHQ apresentaram menos de 2,5% de freqüência do genótipo. Na IHC, 16 animais com exame positivo para a presença da proteína priônica celular alterada (PrPSc) foram detectados. As tonsilas foram o tecido com a mais alta porcentagem de amostras reativas: 81,25% do total das amostras positivas. Considerando os 16 animais positivos, nove (56,25%) tinham o genótipo ARR/ARQ, seguido pelo genótipo ARQ/ARQ com 31,25% (n = 5) e ARQ/VRQ com 12,5% (n = 2). Todos os animais positivos estavam clinicamente saudáveis, representando, portanto, 14,14% de casos pré-clínicos de scrapie neste rebanho.

Polimorfismo do gene da proteína prion celular (PrPC) e imunohistoquímica de tecido linfóide em ovinos / Polymorphism of cellular prion protein (PrPC) and immunohistochemistry of lymphoid tissue of sheep

O objetivo deste trabalho foi avaliar o polimorfismo do gene da proteína prion celular (PRPN) de ovinos introduzidos numa propriedade onde ocorreu um surto de scrapie, e relacionar com a suscetibilidade à doença por meio da análise da presença da proteína prion celular alterada (PrPSc), utilizando imunohistoquímica (IHQ) de tecido linfóide associado à mucosa reto-anal. Foram avaliados 42 ovinos, mestiços Texel. Eram fêmeas entre um e oito anos de idade, sendo que sete (16,67%) ovelhas foram introduzidas adultas na propriedade em 2006. As demais, 83,33%, eram nascidas na fazenda. A genotipagem do PRPN foi feita pela análise do polimorfismo de comprimento de fragmento de restrição - RFLP ("Restriction Fragment Lenght Polimorphism"). O genótipo ARQ/ARQ foi o mais freqüente, encontrado em 73,81% dos animais, seguido do genótipo ARR/ARQ, com 16,67% e do ARQ/VRQ, com 9,52%. Os alelos ARH e AHQ não foram encontrados nestes animais. O resultado da IHQ foi negativo em todas as amostras. Não foi possível, portanto, estabelecer uma relação entre genótipo e maior susceptibilidade ao scrapie, devido à ausência de PrPSc na amostras examinadas. No Brasil, há poucos dados de genotipagem do gene da proteína prion celular (PRNP) em ovinos e, até o momento, nenhum tipo de controle baseado em cruzamentos direcionados foi implementado.

The aim of this work was to study the polymorphism of the prion protein gene (PRNP) of a sheep flock raised in a farm where a scrapie outbreak had occurred, and to relate to disease susceptibility of possible animals infected with altered prion protein (PrPSc), by immunohistochemical analysis of recto-anal mucosa-associated lymphoid tissue (RAMALT). Forty two sheep, crossbred with Texel, Ile de France, Dorper and Suffolk were used. Females were between one and eight years old, and seven (16.67%) were adult ewes when they entered the flock in 2006. The rest, 83.33% were born in the farm. The PRNP genotyping was performed by RFLP ("restriction fragment length polymorphism") analysis. The most frequent genotype was ARQ/ARQ, found in 73.81% of the animals, followed by ARR/ARQ, with 16.67% and ARQ/VRQ, with 9.52%. The ARH and AHQ alleles were not found. All RAMALT samples were negative in immunohistochemical analysis. It was not possible to establish a relation between PRNP polymorphisms and susceptibility to scrapie, due to the lack of positive samples to PrPSc. In Brazil, there is little available PRNP genotyping data of sheep and, so far, no type of controlled breeding scheme for scrapie has been implemented.

Toxoplasma gondii in goats from Curitiba, Paraná, Brazil: risks factors and epidemiology / Toxoplasma gondii em caprinos de Curitiba, Paraná, Brasil: fatores de risco e epidemiologia

Toxoplasmosis is a zoonosis caused by Toxoplasma gondii, a protozoan with wide geographical distribution and minimal parasitic specificity that affects many species of wild and domestic animals. In livestock, especially in small ruminants like goats, toxoplasmosis can cause abortion and the birth of weak animals, leading to economic losses to farmers, and is a major source of human infection. This is a seroepidemiological study of toxoplasmosis in goats in the state of Paraná, Brazil. Sera from 405 goats from the metropolitan mesoregion of Curitiba, eastern state, were tested by the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and indirect immunofluorescence antibody test (IFAT). Information on properties and goat characteristics was also collected using questionnaires. The prevalence of toxoplasmosis was 39.41 and 35.96% by ELISA and IFAT, respectively. T. gondii antibody prevalence increased with age. The risk factors for T. gondii infection in goats were: age over one year; exposure to cats, type of management and purpose of breeding. Other epidemiological factors and relevant control measures are discussed in the current study.

A toxoplasmose é uma zoonose causada pelo Toxoplasma gondii, um protozoário com vasta distribuição geográfica e pouca especificidade parasitária, que pode afetar muitas espécies de animais selvagens e domésticos. Em animais de produção, especialmente pequenos ruminantes, como caprinos, pode provocar abortos e nascimento de crias fracas, causando perdas econômicas para os criadores, além de ser uma importante fonte de infecção humana. Este é um estudo soroepidemiológico para toxoplasmose caprina no Estado do Paraná. Soros de 405 caprinos da mesorregião metropolitana de Curitiba, no leste paranaense foram avaliados pelas técnicas de imunoensaio enzimático (ELISA) e reação de imunofluorescência indireta (RIFI), além da avaliação de questionários com dados das propriedades e animais estudados. A prevalência encontrada foi de 39,41 e 35,96% para as técnicas ELISA e RIFI, respectivamente. A prevalência de anticorpos anti-T. gondii aumenta com a idade dos animais. Os fatores de risco para infecção por T. gondii em caprinos encontrados neste estudo são: idade acima de um ano, presença de gatos, tipo de manejo e propósito da criação. Outros fatores epidemiológicos e medidas de controle são discutidos no presente trabalho.

Resistance of gastrointestinal nematodes to anthelmintics in sheep (Ovis aries)

O teste de redução da contagem de ovos de helmintos por grama de fezes (FECRT) foi usado para testar a eficiência dos antihelmínticos em 42 propriedades produtoras de ovinos, em cinco diferentes regiões no Estado do Paraná, Brasil. O estudo foi realizado entre Julho 1996 a Julho de 2000. Foram avaliados animais com infecção natural. Cinco drogas foram usadas só ou em combinação (benzimidazole, imidazothiazole, ivermectin, milbemicina e closantel). Resultados mostraram que a prevalência de resistência foi alta para todos os antihelmínticos avaliados: 88.1% para benzimidazoles (oxfendazole), 78.6% para ivermectin, 56.4% para closantel, 38.7% para closantel + oxfendazole, 38% para levamisole, e 23.6% para moxidectin. Havia resistência múltipla em todas fazendas estudadas. Na identificação das larvas de helmintos recuperadas das culturas de fezes após o tratamento verificou-se que maioria pertenciam a Haemonchus sp. e Trichostrongylus sp. O fracasso das drogas existentes no mercado em combater a verminose é considerado um assunto importante. No presente artigo algumas sugestões são discutidas para melhorar a situação, elas incluem uma mudança de atitude em relação ao uso indiscriminado de antihelmínticos.